Présentation de la technique VIDAS : détéction rapide des pathogènes dans les aliments.

Intro :

Présent sur 12 000 sites dans le monde et dans 3 300 laboratoires français d'analyses médicales, le Vidas® est un automate multiparamétrique très utilisé. Sa conception consiste en l'utilisation de cartouches individuelles. La technique utilisée est la technique Elfa (enzyme linked fluorescence assay) de très bonne sensibilité.
C’est une méthode autorisée pour les analyses officielles de recherche d'entérotoxines de Staphylococcus aureus dans toutes matrices alimentaires par le ministère de l’agriculture en 2012
Principe :

Schéma du test sandwich ELFA utilisé dans la technologie VIDAS

Dans les cupules, nous avons des anticorps spécifiques à l'entité recherchée. Une fois l'entité détéctée par l'anticorps, celui ci se fixe. On a un complexe Ag-Ac. Un second Ac couplé à une enzyme reconait le complexe. L'ajout du substrat révèle par fluorescence la présence ou non de la bactérie recherchée.

Remarques :
Pour une plus grande spécificité : l'élimination du fragment Fc diminue le risque d'interférence avec les matrices alimentaires et de liaison non spécifique d'autres bactéries pouvant générer de faux signaux.
Pour une plus grande sensibilité : la libération de deux fragments Fab' plus petits optimise le positionnement de l'anticorps et favorise la reconnaissance de l'antigène.

Matériels :

VIDAS est un test unitaire composé d’une barrette réactionnelle contenant des réactifs prêts à l’emploi et d’un réceptacle en phase solide (SPR/Solid Phase Receptacle) dont la paroi interne est revêtue d’anticorps spécifiques.

L’analyseur VIDAS totalement automatisé effectue toutes les étapes du test et imprime le résultat: échantillons positifs ou négatifs

Protocole général :

Prélèvement de 25g ou 25ml de l’échantillon dilué dans 25 ml de tampon d’extraction centrifugation 15 min de 3000 à 5000g (18-25°C)
Prélèvement du surnageant avec une