Histone

autant de changement dans la séquence nucléotidique, et qui affectent durablement l’expression des gènes Un ensemble de modifications touchant l’ADN et les protéines associées L’ADN ou les histones associées = chromatine Structure Chaine d’ADN enroulée autour des structures protéiques, les histones = nucléosome Le collier de perles s’enroule encore sur lui-même, les nucléosomes s’accolent les uns aux autres = fibres de chromatine A certains endroits, les nucléosomes sont fort accolés, à

de compactage: Le 1er niveau de compactage c’est l’ADN qui s’associe aux protéines (les histones), sa va former une fibre caractéristique, c’est la fibre nucléosomique, encore appelé fibre A ou fibre en collier de perles. Une perle : 8 histones, ces perles= nucléosome. L’ADN tourne 2 fois autour de l’histone. A pH physiologique 7.2 les groupements vont être ionisés et avoir un groupement NH3+. Les histones sont chargées positivement. Par ailleurs la charge de l’ADN qui est chargé négativement.

anticorps antiMYC, anti-USF ou anti-histone H4 acétylée. L’ADN est extrait de la chromatine immunoprécipitée et soumis à PCR avec des amorces spécifiques du promoteur du gène PIGR (la taille attendue est de 205 bp). Le fragment amplifié contient le motif E. Les fragments PCR sont analysés par électrophorèse Figure 3 Piste 1 : chromatine incubée avec un anticorps contre une protéine non chromatinienne Piste 2 : chromatine immunoprécipitée par un anticorps anti histone H4 acétylée Piste 3 : chromatine

protéines à partir d’un gène unique. Grand répertoire de protéines différentes. Changement de technologie : spectrométrie de masse : permet de connaitre la masse et la composition exacte des protéines. D’abord application aux protéines abondantes (histones, hémoglobine…) Grande variété de modifications post-traductionnelles : glycosylation, acétylation, hydroxylation, méthylation, phosphorylation, farnesylation, ubiquitination, sumoylation… Ces modifications sont essentielles à l’acquisition de

champ de son potentiel de différenciation se rétrécit… A B B C D Dans le noyau, la molécule d’ADN est enroulée autour de protéines appelées les histones Cette organisation ne permet pas aux gènes d’être activés pour donner des ARNs et des protéines Des modifications chimiques apposées sur l’ADN et les protéines histones permettent un dépliement de la molécule d’ADN et l’activation de certains gènes. Ces modifications chimiques constituent une mémoire cellulaire Ils indiquent

de l’ADN avec des petites protéines basiques appelées histones. Les histones s’associent au repliement de l’ADN au nombre de 4 : H2A, H2B, H3 et H4. Ces histones s’organisent en octamère, un octamère est constitué de 2 molécules de chacune des 4 histones. Le repliement de l’ADN assume presque 2 fois autour de l’octamère et se prolonge de part et d’autre de l’octamère par un segment libreque l’on appelle lien nucléosomique. L’ensemble ADN/histones constitue un nucléosome. La succession de nucléosomes

ses membres, on observe une réactivation de gènes inactifs depuis le developpement embryonnaire. Ainsi les cellules au niveau de l'amputation et les gènes responsables de la formation du nouveau membre se reveillent grace à une déméthylation des histones. (a définir déméthylation) 2)Avancées (Scott Stewart/Salk Institute for Biological Studies) Comme la régénération reprend les mécanismes du développement embryonnaire, les chercheurs du Salk Institute ont commencé par chercher les similarités

protéines l ’ADN est stocké et agencé sous forme de chromosomes ou de chromatine à différents degrés de condensation. Biochimie des acides nucléiques 20 A. PREMIER NIVEAU DE COMPACTION : LE NUCLEOSOME… Filament d’ADN (146 pb) HISTONE DE LIAISON (histone H1) HISTONES DE CŒUR 2 X (H2A + H2B + H3 + H4) Biochimie des acides nucléiques 21 ….QUI CONDUIT À LA FIBRE DE CHROMATINE DE 10 NM Le collier de perles Biochimie des acides nucléiques 22 B. DEUXIEME NIVEAU DE COMPACTION : LA FIBRE

phosphoryl° des histones H2AX, qui deviennent γH2AX  γH2AX = témoin d’une cassure de l’ADN 3) Fixation ô du site de cassure d’un autre complexe (BRCA1…) ATM ATM   ATM P γH2AX P γH2AX AMPLIFICATION Rôle ++ de l’amplif° : permet de dépasser un seuil nécessaire pour : 4) activation des kinases ÉFFECTRICE (CHK2) CHK2 Arrêt du cycle transducteur, dont le rôle est de recruter d’autres molécules d’ATM  Phospho° étendue (sur plusieurs milliers de pdb) des histones H2AX

L'hétérochromatine est localisée principalement en périphérie du noyau et du nucléole. Histone :  protéines très riches en acides aminés basiques, que l'on trouve dans le noyau des cellules eucaryotes, elles sont les principaux constituants protéiques des chromosomes. Elles sont en effet étroitement associées à l’ADN dont elles permettent la compaction autour de structures appelées nucléosomes : l'ADN y est enroulé autour des histones comme du fil autour d'une bobine. Lysosome :  organites cellulaires de