Approche pratique de la microbiologie des Eucaryotes :

→ Introduction

Les micro-organismes ont été les premières formes de vie à se développer sur Terre. Ils se répartissent en plusieurs groupes comme les Fungi, les Algues, les Protistes et les myxomycètes. Les eucaryotes pluricellulaires ne représentent qu'une petite fraction de la diversité totale. Ils se caractérisent notamment par la présence d'un noyau, de mitochondries ainsi qu'une multitude d'organite dans leur cellule.
Au cours de ce TP, nous voulons illustrer la diversité de ces micro-organismes eucaryotes en étudiant certains d'entre eux :
-Dicty dit amibe sociale par l'étude dans des conditions défavorables de son développement de la forme végétative amibe en corps fructifère formés de spores qui assurent la survie de celle-ci.
-Deux apicomplexes Toxoplasma gondii et Plasmodium falciparum par la mise en évidence de quelques caractéristiques de leur vie intra-cellulaire.
-l'analyse par planche de microscopie électronique de différents groupes de protistes. → Matériel et méthodes

→ Dictyostelium discoideum

Nous avons travaillé sur une amibe sociale : Dictyostelium discoideum.
Lors de conditions nutritionnelles favorables, elle se multiplie à l'état unicellulaire. Mais en conditions de carence nutritive, les cellules entament un cycle de développement pour aboutir à la formation d'un corps fructifère constitué d'une tige, sur laquelle repose une boule de spores. Nous avons donc chercher les facteurs nécessaires ou influençant l'entrée de l'amibe dans le cycle de développement (concentration cellulaire, quantité de nutriments disponibles, rôle de l'AMPc).
Pour mettre en évidence la différenciation des cellules de spores et de tige nous disposons de 2 souches : 'D19' et 'EcmAO' qui contiennent un plasmide contenant le gène lacZ respectivement sous contrôle d'un promoteur spécifique de spores ou de tige.

-développement de Dicty sur gélose phosphate
Le but est de déterminer l'influence de la